山茶花葉片dna提取及rapd反應體系的研究

山茶花（camellia japonica l.）是我國特產的名貴花卉之一,由于其品種繁多,在系統分類和品種鑒定上存在一定的難度.本研究針對山茶花的dna提取方法和rapd擴增體系進行了摸索,旨在為山茶花在dna水平的分類鑒定和分子生物學方面研究打下一定的基礎.實驗采用改進的ctab法提取山茶花葉片dna,得到的dna純度較高,od260/od230值為1.90～2.0,od260/od280值為1.80～1.83,得率也較高,一般在150～200μg·g-1左右,片段完整性較好,大于20kb,符合分子遺傳實驗的要求;在山茶花rapd擴增條件的研究中,發現20μl反應體系中加入100ng dna、125 μmol·l-1dntp（each）、1.2μmol·l-1mg2＋、1×buffer、0.5μmol·l-1引物、1 u taq酶最為合適,退火溫度一般設為37℃左右,擴增產物的電泳條帶數多、清晰、明亮.完成機構：浙江師范大學化學與生命科學學院,金華,321004