微囊牛腎上腺髓質細胞的凍存及其活性評價

目的 建立一種微囊牛腎上腺髓質細胞(bovine chromaffin cell，bcc)的凍存方法，為臨床推廣微囊人工生物細胞技術移植異種細胞奠定基礎。方法 微囊化牛腎上腺髓質細胞凍存以二甲基亞砜為保護劑，循序緩慢降溫(4℃，1h，-20℃ 2h，-50℃過夜，液氮)，復蘇時迅速將凍存管放入37℃水浴中。通過檢測其基礎兒茶酚胺分泌量和在高鉀(58mmol／l)、乙酰膽堿(10^-4mol／l)刺激下的分泌量來觀察其功能活性。結果 凍存復蘇后微囊bcc保留了兒茶酚胺的分泌功能，基礎與刺激分泌量分別為(3．207±0．350)ng／ml和(12．496±2．302)ng/m1，大約為凍存前微囊牛腎上腺髓質細胞分泌量的80％；同時刺激后兒茶酚胺分泌增加(p<0．01)。結論 建立一種微囊牛腎上腺髓質細胞的凍存方法，通過功能檢測證明該方法是有效和成功的。完成機構：衛生部人工細胞工程技術研究中心，天津300170